Title:

Rola białka Mbd3 w procesie epileptogenezy : praca doktorska

Creator:

Nizińska-Smolińska, Karolina

Institutional creator:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Contributor:

Łukasiuk, Katarzyna (1965- ) : Promotor

Publisher:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. M. Nenckiego PAN

Place of publishing:

Warszawa

Date issued/created:

2022

Description:

168 stron : ilustracje ; 30 cm ; Bibliografia ; Streszczenie w języku angielskim

Degree grantor:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Type of object:

Praca dyplomowa

Subject and Keywords:

Białko Mbd3 ; Epileptogeneza ; Napad drgawkowy ; Padaczka ; Pentylenetetrazol (PTZ)

Abstract:

Białko MBD3 (ang. methyl CpG binding domain 3) należy do rodziny białek MBD, odpowiedzialnych za odczytywanie wzoru metylacji DNA. Białka rodziny MBD wiążą domenę metylo-CpG, a także biorą udział w tworzeniu heterochromatyny. Co ciekawe, białko MBD3 nie ma zdolności do selektywnego rozpoznawania wysp metylo-CpG, jednakże jego charakterystyczną cechą jest zdolność wiązania do 5-hydroksymetylocytozyny i niemetylowanego DNA. Badania przeprowadzone przez Bednarczyk i współpracowników (Bednarczyk i wsp. 2016) z zastosowaniem modelu padaczki skroniowej, wywołanej elektryczną stymulacją ciała migdałowatego, u szczura, wykazały wzrost poziomu białek kompleksu NuRD, w tym białka Mbd3 w mózgu zwierząt z padaczką. Zaobserwowano również większą liczbę regionów DNA, do których przyłącza się kompleks NuRD, zawierający białko Mbd3, u zwierząt stymulowanych, w porównaniu do grupy zwierząt kontrolnych. Celem doświadczeń przeprowadzonych w niniejszej rozprawie było zbadanie, czy białko Mbd3 uczestniczy w procesach prowadzących do zmiany progu drgawkowego. Zbadano wpływ drgawek wywołanych pentylenetetrazolem (PTZ) na poziom białka Mbd3 oraz ekspresję mRNA Mbd3 in vivo. Wykazano wzrost poziomu białka Mbd3 w korze śródwęchowej i ciele migdałowatym szczurów 4 godziny po wywołanej drgawce.W dalszej części pracy oceniono wpływ obniżenia i podwyższenia poziomu białka Mbd3 na próg drgawkowy in vivo. W celu modyfikacji poziomu Mbd3 wykorzystano komercyjnie zaprojektowane wektory wirusowe AAV. Wykazano, że obniżenie poziomu Mbd3 wydłuża czas latencji do pojawienia się drgawki indukowanej iniekcją PTZ.Przeprowadzone doświadczenia behawioralne wykazały, że obniżenie poziomu białka MBD3 zwiększa poziom lęku u zwierząt. Z kolei nadekspresja Mbd3 zmniejsza reakcje lękowe u zwierząt i nasila ich pobudliwość oraz zwiększa aktywność w teście otwartego pola. Zbadano również wpływ obniżenia i podwyższenia poziomu białka Mbd3 na epileptogenezę w modelu rozniecania (ang. kindling) przy użyciu PTZ. Wykazano, że podwyższenie poziomu białka Mbd3 przyśpiesza proces epileptogenezy i rozwój drgawek toniczno-klonicznych. W celu identyfikacji roli białka Mbd3 w regulacji ekspresji genów przeprowadzono doświadczenia in vitro, z zastosowaniem modelu wyładowań epileptopodobnych wywołanych niedoborem magnezu. Wykazano, że nadekspresja Mbd3 in vitro wywołuje zmiany w ekspresji genów w sposób specyficzny dla czasu i stanu neuronów.Dane otrzymane w wyniku realizacji tego projektu wskazują na udział białka Mbd3 w patologii padaczki

Resource type:

Tekst

Detailed Resource Type:

Praca doktorska

Source:

IBD PAN, sygn. 20198 ; click here to follow the link

Language:

pol

Language of abstract:

eng

Digitizing institution:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego Polskiej Akademii Nauk

Original in:

Biblioteka Instytutu Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Access:

Otwarty

×

Citation

Citation style: